細胞培養(yǎng)在科研領域里面算是成本費用比較高的一項,很多客戶問我們,為什么我們把細胞產品發(fā)貨到他們手上的時候,細胞長勢以及傳代能力很好;而客戶自己培養(yǎng)一段時間后,細胞長勢就不行了甚至死亡?細胞培養(yǎng)不容馬虎大意,在此愛測智能科技小編介紹下正確的細胞培養(yǎng)無菌操作的步驟:
1. 實驗進行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%酒精擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的中央無菌區(qū)域,勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。
3. 小心取用無菌的實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口,亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應注意自身的安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA 等,并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 另外還需定期檢測CO2鋼瓶的CO2壓力。
6. 水槽可添加消毒劑,定期更換水槽的水。
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